行业新闻 | Rarecells：从非小细胞和小细胞肺癌患者中分离出的循环肿瘤细胞的表型特征

肺癌在全球范围内影响着数百万患者，是癌症中死亡率和患病率最高的类型[1-3]。肺癌主要分为两种类型：非小细胞肺癌（NSCLC）和小细胞肺癌（SCLC），分别占据了约85％和15％的肺癌病例[1、3-5]。高转移潜力、早期复发和最终死亡是肺癌的主要特征[1、3、4、6]。

此外，小细胞肺癌是最具攻击性的类型，通常表现为患者血液中循环肿瘤细胞（CTCs）数量较高[5、7]。肺癌患者通常在晚期被诊断出来[6]，通过实体活检获得样本很难[8]。相对于样本采集，液体活检具有更高的可及性，而CTCs代表了癌症分子和细胞异质性的更全面视角，包括来自原发肿瘤和/或转移病灶的信息[2、7、8]。在过去的二十年中，CTCs的枚举和表型特征表明了对癌症患者预后的鼓舞人心的结果，并为改进诊断和潜在的靶向治疗提供了有用的生物标志物[1、7-9]。另一方面，有报道称CTCs，尤其是肺癌中的CTCs，可能表达低水平的上皮标记物[1、7、9-11]，这增加了其检测的难度。造成CTCs上皮标记物丧失的一个可能机制是上皮-间充质转化（EMT）[11-15]。此外，有研究表明，CTCs的一些群体可能表达干细胞样的标记物[4、16、17]。这些观察结果进一步加强了CTCs中新生物标志物的需求，以提高其在临床实践中的作用。

该小组早期对来自乳腺癌患者的CTCs[18]和分散的肿瘤细胞（DTCs）[19]的研究发现了一对新的生物标志物，即C-X-C基序化学因子受体4（CXCR4）和转录因子JUNB。CXCR4通过白细胞迁移和造血调节参与稳态，但也参与多种肿瘤，包括肺癌[20,21]的进展和转移。转录因子JUNB在细胞增殖和分化过程中发挥着重要作用，但也参与侵袭和转移[22-24]，并涉及与多种肿瘤相关的EMT途径，包括肺癌[25-27]。

他们的研究表明，与正常供体和患者外周血单个核细胞（PBMCs）相比，从转移性乳腺癌患者中分离的CTCs中，JUNB和CXCR4显著过度表达。JUNB的存在与中位PFS和OS显著降低有关。JUNB还成为OS的独立预测因子[18]。先前的报告表明，CXCR4在NSCLC中表达，并与患者生存期缩短有关[20,28]，而其他研究则表明，在NSCLC中表达的CXCR4与EMT和类干细胞特性有关[16,29]。此外，在广泛期疾病的SCLC患者的CTCs中，CXCR4在化疗开始之前过度表达，其存在对短PFS有预测作用[30]。

进入淋巴和血液中的CTCs可以被转移到骨髓中，在那里它们可以作为DTCs存活，随后形成转移灶。他们以前也表明，从早期非转移性乳腺癌患者的骨髓中分离出的DTCs也表达高水平的JUNB和CXCR4，其表达水平与其他乳腺癌细胞系相似或更高[19]。CK+/JUNB+/CXCR4+表型是DTCs中最常见的，与低OS有关[19]。

在本研究中，对方首次评估了来自NSCLC和SCLC患者的CTCs中JUNB和CXCR4的表达，并检查它们的表达是否与临床结果相关。

在这项研究中，对方评估了JUNB和CXCR4在肺癌患者循环肿瘤细胞（CTCs）中的表达，并调查这些蛋白质是否具有预后临床相关性。

使用ISET膜过滤了30名非小细胞肺癌（NSCLC）患者的外周血液，并使用共聚焦和VyCAP显微镜分析了37名小细胞肺癌（SCLC）患者的细胞制片。JUNB和CXCR4均在绝大多数肺癌患者中表达。有趣的是，非小细胞癌和小细胞癌患者的表型模式不同；（CK+/JUNB+/CXCR4+）表型在50％的非小细胞癌患者中和71％的小细胞癌患者中存在。

同样，（CK+/JUNB+/CXCR4–）在44％和71％，（CK+/JUNB–/CXCR4+）在6％和71％，（CK+/JUNB–/CXCR4–）表型在38％非小细胞癌患者和84％小细胞癌患者中存在。在NSCLC中，具有（CK+/JUNB+/CXCR4+）表型的≥1 CTC存在与较差的无进展生存（PFS）相关（p = 0.007，HR = 5.21），而具有≥2个表型的患者具有较差的总生存（OS）（p <0.001，HR = 2.16）。在广泛期SCLC患者中，具有≥4个CXCR4阳性CTC与较短的OS相关（p = 0.041，HR = 5.01）。因此，JUNB和CXCR4在肺癌患者的CTCs中表达，并与患者的生存相关，表明它们在肿瘤进展中发挥着关键作用，可作为肺癌患者的预后标志物。

当然，正如研究团队所说的那样，这是一项初步研究，目前的结果必须在更大的患者群体中得到证实。此外，研究应该包括更多的患者，甚至在不同的治疗时间点，提供有关这些蛋白质的预后和预测相关性的信息。尽管此次样本中的患者数量相对较少，但它为肺癌患者 CTC 中 JUNB 和 CXCR4 表达的重要性提供了基础，作为患者生存率低的指标，并进一步支持它们在转移中的作用，证实了相关研究 [ 20–24,26,37,40]。还值得注意的是，目前的几项胰腺癌临床试验（NCT04177810、NCT02907099）包括抗 PD-1/PD-L1 疗法与抗 CXCR4 疗法相结合。因此，对 PD-L1 和 CXCR4 的分析可以为将来的肺癌患者提供更多信息。

文章来源：

Cancers 2023, 15(1), 171; https://doi.org/10.3390/cancers15010171